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技術(shù)文章

TECHNICAL ARTICLES

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  • 20213-31
    帕臘南病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)流程常規(guī)程序

    帕臘南病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)流程常規(guī)程序:將PCR反應(yīng)所需的成分配置完后,在PCR儀上于94-96℃預(yù)加熱幾十秒至幾分鐘,使模板DNA充分變性,然后進(jìn)入擴(kuò)增循環(huán)。在每一個(gè)循環(huán)中,先于94℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復(fù)性溫度(一般50-60℃之間),一般保持30秒鐘,使引物與模板充分退火;在72℃保持1分鐘(擴(kuò)增1kb片段),使引物在模板上延伸,合成DNA,完成一個(gè)循環(huán)。重復(fù)這樣的循環(huán)25~35次,使擴(kuò)增的DNA段大量累積。在72℃保持3-7min,使產(chǎn)物延伸完整...

  • 20213-30
    瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

    瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,...

  • 20213-25
    蛙病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則

    蛙病毒PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)規(guī)則:1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液...

  • 20213-25
    LAMP試劑盒所體現(xiàn)的擴(kuò)增技術(shù)探討

    LAMP試劑盒的性狀為盒裝液體,在運(yùn)輸方面一般為快遞運(yùn)輸,產(chǎn)品廣泛用于科研而不用于臨床。對(duì)于PCR方法來說在人類及動(dòng)植物疾病基因診斷、食品分析和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域發(fā)揮著舉足輕重的作用,其靈敏度高、特異性好,是目前準(zhǔn)確的基因診斷方法。然而PCR方法操作起來較復(fù)雜,對(duì)儀器和人員要求比較高,不適合基層或現(xiàn)場快速診斷,因此在國內(nèi)的推廣速度并不是很快。21世紀(jì)初日本學(xué)者公開了一種新的基因診斷技術(shù),即LAMP(Loop-mediatedisothermalamplification),中文名...

  • 20213-24
    馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

    馬爾太蟲通用PCR檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*...

  • 20213-23
    火雞沙門氏菌PCR檢測試劑盒注意事項(xiàng)

    火雞沙門氏菌PCR檢測試劑盒注意事項(xiàng):1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連...

  • 20213-18
    金氏金氏菌PCR檢測試劑盒注意事項(xiàng)

    金氏金氏菌PCR檢測試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)...

  • 20213-17
    溶酪巨球菌PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素

    溶酪巨球菌PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含...

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